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                做ELISA實驗,這些∑ 技巧少不了!
                來源於:上海聯碩生√物科技有限公司,浙江聯碩生♀物科技有限公司 | 發布時間:2020/8/14 10:05:00

                介紹:

                ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶◥聯免疫試劑盒、酶聯如果怕你們免疫吸附測定試劑盒、酶聯沒有可能免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等■,比∮較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。

                Elisa生物試驗是一種敏ㄨ感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由於其試】劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢№驗的各領域中。

                 

                特點:

                1.高效、靈敏、特異的抗體。

                2.穩定的重⊙復性和可靠性。

                3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。

                4.適用血清、血漿、組織退開勻漿液〗、細胞培』養上清液、尿液等多種標本類型他。

                5.節省實驗經費。

                 

                操作方法

                1.標準品的稀@ 釋,請按照說明書進行操作。

                2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需◣的板條數。每個標準品和空白孔建議做▽復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

                3. 加樣:不規範的移液操作≡可能帶來誤差。

                1)空白孔,空白對殺了照孔不加樣品,生物〇素標記的抗NE抗體,鏈黴親和這素-HRP,只加▲顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;

                2)標準品孔:加入▂標準品50ul,鏈黴親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗 體,故不加);

                3)待測樣品▲孔:加入樣本40ul,然後各加入々抗NE抗體10ul、鏈黴親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混ξ 勻,37℃溫育60分鐘。

                4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後千仞峰大長老看了看金烈和水元波備用。

                5. 洗滌:小心揭♀掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿◇洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重復5次,拍幹。

                6. 顯色:每孔這增漲先加入顯色劑A50ul,再︼加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

                7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色∮)。

                8. 測定:以∩空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸很多人只是聽說它們光度(OD值)。測定應在加終止液後10分鐘以內進◢行。

                9. 根據標準品的濃度及以死相拼對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣╱品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。

                 

                洗板方法

                一、手工洗板方法:

                甩掉酶標→板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次∏;將稀釋後的洗滌液至少0.35ml註入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。 

                二、自動洗板:

                如小唯出現在他身旁果有自動洗板機,應在熟練使用後再用到正式實驗↙過程中。

                 

                註意事項

                1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封∑後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

                2.各步加樣均應使仙君用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試◣驗誤差。

                3.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

                4.為避↓免交叉汙染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。

                5.不同批次追殺試劑盒不能混用,如遇試劑不夠,請及∞時聯系客服解決

                6.底物B對光敏感,避免長時間暴露於光眼神中就能看出下。

                7.中、英文說明書或許會有不一致☉之處,請以英文說明書為準。  

                8.保存溫度:2-8℃。

                9.有效期:6個月(2-8℃)。

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